Abstrakt
Stanovení koncentrace lithného kationtu v neředěném séru (plazmě) a
v plazmě elektrochemicky pomocí iontově selektivní elektrody (ISE) na
analyzátor Cobas Integra 400 plus.
Seznam souvisejících dokumentů a textů
Kódy a názvy v různých klasifikačních systémech
Li+, lithný kation, sodík. lithium
Kód LIRS: 309
Seznam zdravotních výkonů: 99149
Princip
Koncentrace lithia v séru stanoví
elektrochemicky podle Nernstovy rovnice.
E= EO + S * log Ci ,
Kde E je rozdíl potenciálu mezi měrnou a referenční elektrodou EO
je standardní potenciál, S je směrnice elektrody, Ci koncentrace
měřeného iontu ve vzorku. Výpočet koncentrace je prováděn pomocí faktoru Sol1F
a S –směrnice elektrody. Pro měření E se používá iontově selektivní elektrody
(ISE).
Metoda stanovení Na+ iontově selektivní elektrodou využívá
membránový potenciál, který se tvoří na rozhraní roztoků s rozdílnými
koncentracemi iontu. Podle Nernstovy rovnice závisí tento potenciál na aktivitě
iontů na obou stranách membrány. Matematické rovnice popisují také chování
iontů v roztoku a vztah aktivity iontů k jejich koncentraci, zahrnují i iontové
síly v plné krvi, plazmě a séru. Výsledná rovnice koreluje všechny jevy s
naměřeným rozdílem potenciálů mezi vzorkem a standardním roztokem na referenční
elektrodě. Tato logaritmická rovnice je zpracována počítačem v přístroji a její
řešení udává koncentraci sodíku v mmol/l
Definice a terminologie
Rutinní metoda, provádí se na
analyzátoru Cobas Integra 400 plus v
neředěním vzorku.
Místo provádění postupu
Oddělení klinické biochemie Psychiatrické léčebny v Opavě, Olomoucká
88, 746 01 Opava
Bezpečnostní aspekty
Je nutné dodržovat obecné zásady bezpečnosti práce podle ČSN 01 8003, ale i zásady práce s biologickým materiálem, který může být zdrojem přenosu některých infekcí. Zejména je třeba zachovávat pravidla osobní hygieny, používat osobní ochranné pracovní prostředky (oděv, obuv a podobně), při práci nejíst, nepít a nekouřit. Po práci a před jídlem omýt pokožku především rukou teplou vodou a mýdlem a ošetřit vhodným reparačním krémem (viz zásady bezpečnosti práce). Při zasažení očí vymývat velkým množstvím vlažné vody nejméně 15 minut. Při zasažení oděvu a kůže odložit veškeré kontaminované oblečení. Okamžitě kůži omýt velkým množstvím pokud možno vlažné vody popř. mýdlem nebo jiným vhodným mycím prostředkem. Po umytí ošetřit vhodným reparačním krémem. Při náhodném požití vypláchnout ústa, dát vypít asi 1/2 litru vody a vyhledat lékařskou pomoc.
Teorie, použití, preanalytické požadavky
Lithium je používáno při léčení manio-deprasívních poruch.Lithium
je úplně absorbováno v gastrointestinámlním traktu a vrchol koncentrace
nastává po dvou až čtyřech hodinách po orálním užití dávky. Vylučováno je
především ledvinami. Koncentrace lithia je stanovována při sledovávání
spolupráce pacienta a kvůli vyloučení riziko intoxikace
Analytická proveditelnost:
- měřící rozsah: 0,1 –
4,0 mmol/l.
- časová
dostupnost výsledku výsledky jsou k dispozici 2 hodiny od přijetí materiálu,
- ekonomické náklady:
- po zavedení metody
do rutinního provozu provádí stanovení kvalifikovaný laborant
- požadavky na
spolehlivost měřicího systému:
Znaky analytické metody
Mez stanovitelnosti 4,0 mmol/l
Mez detekce 0,1 mmol/l
Diskriminační mez
Specifita Interference
Hemolýza Vyhýbat
se používání hemolytických vzorků.
Hodnoty
hemoglobinu do testované výše 10 g/l by neměly mít vliv.
Ikterus Žádná
významná interference
Léčiva K paletě testovaných léků přibyla i kys. salicylová a bez signifikantního vlivu.
Koncentrace vzorků mezi 0,25 – 1,9
mmol/l.
Alternativní systém
Metoda Koulometricky
Počet vzorků 244
Korelační koeficient (r ) 0,964
(rs) 0,936
Lineární regrese y=0,98x – 0,10 mmol/l
Passing Bablok y=1,06x – 0,16 mmol/l
Biologický rozptyl
-
- intraindividuální:
-
interindividuální:
Odběr materiálu
Stanovení se provádí v nehemolytickém séru nebo plazmě.Speciální příprava
pacienta ani dieta není nutná, pro obvyklé vyšetřování je vhodný odběr ráno, na
lačno. Odběr se provádí ze žíly, za použití soupravy Greiner.
Pro stanovení sodíku je vhodným
vzorkem sérum.
Pro přípravu plazmy je vhodný jen
heparin lithný nebo amonný. Při použití heparinu je důležité dodržet správné
naplnění zkumavky. Menší množství odebrané krve, než je vhodné pro daný typ
zkumavky, vede k malému, ale prokazatelnému, podhodnocení koncentrace
sodíku při měření iontově selektivními elektrodami.
Vzorky se mají neprodleně oddělit od
krevní sraženiny. Vzorky s velkou lipemií je nutné vyčeřit
ultracentrifugací nebo ultrafiltrací.
Zkumavky se separačním gelem
mohou být používány pro odběry, ale při dodržování návodu výrobce. Zachovat
optimální promíchání, dobu srážení a minimální výšku hladiny odebrané krve (cca
1 cm ) nad separačním gelem. V případě, že jsou používány sekundární
zkumavky, dodržovat pravidla a čas centrifugace. Je nezbytné se vyvarovat
kontaktu pipetovací jehly nebo hadiček ISE modulu se separačním gelem.
Stabilita elektrolytů ve vzorcích (sérum nebo plazma) uchovávaných v uzavřených nádobkách:
15 – 25°C 4°C -20°C
Lithium 1 den 7 dnů stabilní
Manipulace s materiálem
Podle běžných zásad práce s biologickým infekčním materiálem.
Přístroje a pomůcky
Analyzátor Cobas Integra 400 plus - ISE modul
Reagencie
ISE Solution 3 1,4 mmol/l
ISE Calibrator Indirect/Urine 0,05 mmol/l
Spotřební materiál
Nádobky typu Eppendorf
Kalibrace
ISE kalibrátory,ISE solution 1,2 a ISE Calibrators Indirect/Urine jsou určeny pro in vitro kalibraci a nastavení ISE jednotky analyzátoru COBAS®INTEGRA 400, je určen pro kvantitativní stanovení sodíku.
Vlastní kalibrace je dvoubodová a je pro celou jednotku ISE jednotná.
Následuje výpočet směrnice a Sol 1F. Akceptovaná je kalibrace s těmito
hodnotami:
Typ Rozsah
testu
(mmol/l)
Na+
0,1 – 4,0
Kalibrační interval je co pět hodin (hlavní kalibrace)a jednobodová kalibrace po každém vzorku .
Pracovní postup
ISE modul je součásti analyzátoru Cobas Integra 400 plus a před zahájením
provozu ISE modulu je nutno provést kontrolu stavu roztoků. Všechny úkony okolo
kalibrace (deproteinace, kondice, aktivace kalibrace a kontrolu kalibrace)
provádí analyzátor automaticky.
Dokumentace, zpracování a hodnocení dat
Celková koncentrace se zjistí výpočtem podle optimální kalibrační křivky
pomocí software analyzátoru. Dále jsou přeneseny do LIRSu a následně vytisknuty
na žádanku pro pacienta.
Způsob vydávání výsledků
Hodnoty se udávají na jedno desetinné místo, v mmol/l, po kontrole na
oddělení. Výsledky se vydávají v elektronické formě, pro terénní lékaře v papírové formě, statimové
výsledky rovněž elektronicky i telefonicky.
Řízení kvality
Jako kontrolní materiál se používají Precinorm U a Precipath U, fy ROCHE,
lyofilizovaná kontrolní séra na základě bovinního albuminu s koncentracemi
složek a aktivitami v normálním rozmezí nebo s patologickými hodnotami
(Precipath U). Připravují se dokonalým rozpuštěním obsahu lahvičky v 5 ml
redestilované vody za pomalého kroužení. Po 30 minutách jsou připravena k
použití. Používají se stejným způsobem jako vzorek, exspirace je udána na
každém balení, po rozpuštění jsou stabilní nejméně 12 hodin při +25 °C, 5 dnů při 4 °C, 1 měsíc při - 20 °C, pokud je kontrolní sérum zmraženo po částech
okamžitě po rekonstituci. Do měření se zařazuje každý den ráno. Kontroly
správnosti vyhodnocuje provozní chemik pomocí Westgardových pravidel, který v
případě nevyhovující kvality podniká určitá opatření: výměnu reagencií, novou
kalibraci a následnou kontrolu správnosti, kontrolu dávkovacího zařízení
analyzátoru atd. Výsledky kontrol jsou průběžně ukládány do paměti analyzátoru,
ranní kontroly jsou vytištěny a ukládají se do desek "Kontrola
metod". Externí kontrola kvality v rámci České republiky je organizována
SEKK, laboratoř se jí účastní 2-krát až 4-krát do roka.
Klinické údaje
Referenční hodnoty:
Sodný kationt (mmol/l) :
ISE direct sérum* 0,6 – 0,2 mmol/l
plazma*
10,6 – 1,2 mmol/l
toxická koncentrace >2,0 mmol/l
koncentrace Lithia přesahující 1,5 mmol/l ve vzorku odebraném 12 hod. po
podání znamená zvýšené riziko toxicity.
Poznámky
Jiné související informace
Literatura
Pracovní manuál pro přístroj Cobas Integra 400 plus
Masopust, J.: Požadování a hodnocení biochemických vyšetření, Avicenum,
1990
Dzúrik, R. a kol.: Štandardná klinickobiochemická diagnostika, Osveta,
1996
Hořejší, J. a kol.: Základy klinické biochemie ve vnitřním lékařství,
Avicenum, 1989
Burtis, C.A., Ashwood, E.R.: Tietz Textbook of Clinical Chemistry,
2.vyd., USA, 1994
Appendixy
Stručný popis postupu
Obsluha provede kontrolu reagencií, kalibraci metod a následnou kontrolu
metod (kontrolu provádí vysokoškolský určený pracovník). Analyzovaný
materiál se umístí do určených stojánků
buď pomocí čárových kódů přímo vytištěných pro daný materiál nebo při
plánovacím způsobu do předem připravených zkumavek označených čárovým kódem.
Požadavky analýz se předají do Cobas Integra on-line z počítače a po
provedení analýzy se převedou elektronicky zpět.Tyto výsledky jsou uchovávány
v systému LIRS.
Autorské poznámky
Doporučení, recenze, schválení
Autor a spoluautoři: RNDr. František Hiemer
Recenze:
Vyjádření: firma ROCHE potvrzuje správnost SOP vytvořených pro analyzátor COBAS INTEGRA
Revize: