Abstrakt
Morfologické odchylky a anomálie v bílé krevní řadě.
Seznam souvisejících
dokumentů
Leukocyty (mikroskopický rozpočet)
Leukocyty (třípopulační diferenciální počet)
Kódy, názvy, definice a terminologie
Seznam zdravotních výkonů s bodovými
hodnotami:
96713 Krevní nátěr
96711 Panoptické obarvení nátěru
96315 Analýza nátěru panopticky obarveného
Princip
Mikroskopické vyšetření - nátěr obarvený
panoptickou technikou se hodnotí pod mikroskopem při 600 - 1000 násobném
zvětšení. Zjišťují se morfologické změny bílých krvinek, dále jejich vzhled a
tvar.
Místo
provádění postupu
OKB Psychiatrické léčebny v Opavě,
hematologické pracoviště.
Bezpečnostní
aspekty
Viz „Směrnice o bezpečnosti práce“.
Fáze
před vyšetřením
Popis anomálií bílých krvinek je nedílnou součástí
rozpočtu bílých krvinek. Požadavkem je čerstvě zhotovený nátěr. Z nesrážlivé
krve je optimální zhotovit nátěr do 2 hodin po odběru.
Odběr primárního vzorku a transport
Žilní nebo kapilární krev odebrat do zkumavky s K3EDTA.
Transport do laboratoře do 2 hodin po odběru.
Odběr lze provést také přímo vpichem do prstu a
okamžitým přenesením kapky nativní krve dotykem na sklíčko.
Omezení
Laboratoř vzorky nepřijme nebo neprovede vyšetření za podmínek, které si předem stanoví.
Manipulace
se vzorky
Vzorky zaevidovat do LIS.
Nátěr provést do 2 -3 hodin po odběru, před vlastním zhotovením nátěru je nutné krev vždy
dobře promíchat. Stabilita neobarveného nátěru je 24 hodin, starší
nátěry jsou zpravidla přebarvené.
Přístroje
a pomůcky
Valivá třepačka
Mikroskop
Sumátor buněk Adder SH-96
Barvicí kyvety
Odměrný válec na 100 - 200 ml
Reagencie
Viz SOP Leukocyty
(mikroskopický rozpočet)
Spotřební
materiál
Podložní sklíčko, roztěrové sklíčko, gáza.
Imerzní olej: balení 50 ml (Olympus)
Směs benzín-éter (8:2):
- Benzín: balení 1 l
- Éter: balení 1 l
Lihobenzín: balení 1 l
Stabilita oleje, benzínu, éteru, lihobenzínu a směsi
benzín-éter je do doby spotřeby při laboratorní teplotě.
Příprava k činnosti
Viz SOP Leukocyty
(mikroskopický rozpočet)
Pracovní
postup
Viz SOP Leukocyty
(mikroskopický rozpočet)
Stručný
popis postupuOSN-E
Kalibrace
a návaznost
Uchovávání obarvených nátěrů.
Charakteristika
spolehlivostiOSN-E
Při hodnocení anomálií je třeba odlišit artefakty
vzniklé při manipulaci se vzorkem krve nebo při zhotovení a barvení nátěru.
Dokumentace, zpracování dat a vydávání výsledků
Nátěr se projíždí pod mikroskopem meandrovitě.
Hledají se anomálie bílé krvinky.
Anomálie bílé krvinky:
-
přítomnost obřích granulocytů (výskyt např. u megaloblastové anémie)
- hyposegmentace (výskyt u Pelger-Huetovy
anomálie, u MDS)
- hypersegmentace (výskyt u
megaloblastové anémie, u dědičné hypersegmentace)
- toxické
zrnění (výskyt u infekcí, při otravách, při léčbě cytostatiky)
- vakuolizace (výskyt fyziologicky u monocytů, patologicky u infekcí, otrav,
hemoblastóz)
-
Döhleho tělíska (šedá až světle modrá políčka v plazmě
neutrofilů;výskyt při
zápalu plic, při spále)
- Auerovy tyče
(splynutí primárních azurofilních granul; výskyt u AML)
- patologická
granula (výskyt u vrozených anomálií – Alderova konstituční anomálie)
Pelger - Heutova anomálie: Snížená segmentace
neutrofilů. Většina z nich má paličkovité, nebo i kulaté jádro. Jaderný
chromatin je velmi hrubý. Funkce granulocytů je normální.
Hypersegmentace neutrofilů: Projevuje se
zvýšením počtu jaderných úseků neutrofilů. Jestliže spočítáme všechny jaderné
úseky ve 100 segmentovaných neutrofilech a počet dělíme 100, pak za normálních
okolností toto číslo nepřevyšuje 2 - 3. Výsledek nad 4 svědčí pro
hypersegmentaci (tzv. Hynkovo číslo).
Alderova konstituční anomálie: Hrubá azurofilní
granulace neutrofilů, eozinofilů, bazofilů a někdy i lymfocytů a monocytů. Jde
o defekt buněčného metabolismu bílkovin a sacharidů.
- virocyty (výskyt u virových infekcí)
- lymfocyty s plazmatickou reakcí (výskyt u virových infekcí)
- lymfocyty lymfomonocytoidního vzhledu (výskyt u infekční mononukleózy)
- lymfocyty se zářezem v jádře (výskyt u CLL, u lymfomů)
-
Gumprechtovy stíny (jaderné stíny; výskyt např. u CLL)
- posun doprava (výskyt u megaloblastové anémie, u sepsí)
-
posun doleva (výskyt u infekcí, otrav, hemolýzy, CML, krvácení)
Formát výsledků: textový soubor , připojený do komentáře
k vyšetření diperenciálního počtu leukocytů.
Vydávání výsledků: ve
formě tištěného výsledkového formuláře nebo z LIS elektronickou cestou.
Doba odezvy: v den
odběru primárního vzorku.
Archivace: denní kniha
výsledků a žádanky po dobu 5 let, elektronicky v archivu LIS.
Referenční a varovná rozmezí
Fyziologické hodnoty: anomálie nejsou přítomny.
Interpretace výsledků, konzultační činnosti a
hlášení
Klinické použití:
Přítomnost některých anomálií a morfologických odchylek slouží k upřesnění
řady diagnóz.
Řízení kvality
Externí kontrola kvality – 4krát ročně.
Poznámky
Dobře obarvený nátěr má
růžovofialovou barvu, přebarvené nátěry jsou modrofialové, málo obarvené jsou
červenorůžové. Při použití vody s pH < 7 místo neutrální mají nátěry
červenou barvu, při použití vody s pH > 7 jsou modrošedé.
Jiné
související informace
Literatura
Marshall, P. N., Bentley, S. A., Lewis, S. M.:
Staining properties and stability of a standardized Romanowsky stain. Journal
of Clinical Pathology 31, 1978, s. 280.
Hrubiško, M. a kol.: Hematologie a krevní transfúze I. Zhotovování a
barvení krevních nátěrů, Avicenum, 1981, s.186-191.
Pecka, M.: Přehled laboratorní hematologie I., Galén, 1995, s.101-108.
Pecka, M.: Přehled laboratorní hematologie II., Galén, 1996, s.58-62,
120-129.
Appendixy
Autorské
poznámky
Dokument bude pravidelně aktualizován.
Barevná příloha je uložena na úseku hematologie
Recenze, schválení
Vypracoval: RNDr. Hiemer František