Abstrakt
Přítomnost relevantní koncentrace benzodiazepinů a jejich
aktivních metabolitů v moči, jako následek zneužívání nebo chybné aplikace
(předávkování) léků s obsahem benzodiazepinů, se kvalitativně
(pozitivní – negativní výsledek) prokazuje pomocí rychlých
imunochemických testů, většinou ve formě testovacích destiček.
Odkazy na jiné relevantní dokumenty, další informace
Benzodiazepiny
Benzodiazepiny v plazmě
Patofyziologické mechanismy ovlivňující koncentraci
Nadměrné vylučování moče například po velkém příjmu tekutin
nebo po aplikaci diuretik může způsobit pokles koncentrace benzodiazepinů a
jejich metabolitů pod cut-off hodnotu a tím negativní nález.
Obráceně nadměrné zakoncentrování moče např. v důsledku omezeného příjmu
tekutin, či velkého pocení při vysoké teplotě prostředí může způsobit pozitivní
nález.
Terapeutické meze
Přímé následky abnormálních koncentrací
Průkaz (pozitivní nález) relevantní koncentrace
benzodiazepinů a jejich metabolitů v moči svědčí buď
o zneužívání léků s obsahem benzodiazepinů nebo o náhodných či záměrných
chybách v dávkování léků (častější aplikace nebo aplikace významně větších
dávek).
Toxické meze
Za průkaz zneužívání benzodiazepinů či chyby v aplikaci
léku se považuje pozitivní nález (objeví se pouze jedna barevná linie a to v
kontrolní oblasti C) u testovací destičky většinou nastavené na cut-off
koncentraci 300 µg/l.
Omezení stanovení
Test je určen pro akutní
klinické případy, kdy umožní zvolit adekvátní terapii. Není vhodný pro soudně
lékařské a forenzní potřeby, pro které by výsledek testu musel být potvrzen
vhodnou kvantitativní
a specifickou metodou založenou například na principu GC/MS.
Při testování „zkušených“ uživatelů drog je nutné bezprostředně kontrolovat
odběr vzorku moče kvůli eliminaci eventuálních snah o ovlivnění výsledku
například naředěním vzorku moče vodou, přídavkem oxidujících (Savo),
redukujících nebo bělících látek či významnou úpravou pH moče. Vyloučena není
ani snaha o záměnu vzorku moče za vzorek spolu pacienta apod.
Použití ve výpočtech a odvozených parametrech
Znaky analytické metody
I když se jedná o kvalitativní průkaz, výrobci testovacích destiček většinou specifikují základní analytické znaky (správnost, specifičnost – zkříženou reaktivitu), které určují porovnáváním výsledků testovacích destiček s výsledky získanými referenční metodou založenou např. na principu GC/MS a to v moči, moči obsahující pouze benzodiazepiny a v moči s současně přidanými jinými relevantními látkami.
Obecný princip používaných imunochemických testovacích destiček:
Test prokazuje přítomnost drogy,
tj. benzodiazepinů v moči. Konjugát (benzodiazepin-protein) imobilizovaný
v membráně testovací destičky soutěží kompetitivně s benzodiazepiny
event. přítomnými v testované moči
o možnost navázaní se na omezené množství zlatem značených protilátek
nanesených na začátek testovací membrány. Barevné protilátky (anti-benzodiazepin
monoclonal antibody) jsou spolu s močí posunovány po membráně. Pokud
v moči drogy nejsou, dostanou se nenavázané protilátky až k pásu konjugátů
v oblasti označené písmenem T (Test region) a vytvoří zde barevný pruh,
což znamená negativní výsledek testu. Pokud jsou v moči benzodiazepiny
přítomné, navážou se na ně protilátky hned na počátku membrány a k pásu
konjugátů se již jako volné nedostanou. V oblasti označené písmenem T
proto žádný barevný pás nevznikne, což znamená pozitivní výsledek testu.
Podmínkou vydání výsledku testu (pozitivní nebo negativní) je přítomnost
barevného kontrolního pruhu v oblasti membrány označené písmenem C
(Control region). Ten vytvoří reakce jiného systému antigen/protilátka
přidávaného výrobcem do setu. Kontrolní barevný pruh potvrzuje, že test byl
proveden správně a že je funkční, tj. že bylo na testovací destičku naneseno
dostatečné množství moče a že se moč dobře nasákla do celé plochy testovací
membrány.
Vzhledem k riziku eventuální snahy vyšetřované osoby o ovlivnění
výsledku – „falšování“ (pozitivní nález má pro vyšetřovaného většinou různé
negativní důsledky) je vhodné dávat přednost těm testovacím systémům, které
mimo vlastní testování přítomnosti drogy současně otestují základní spektrum
potenciálních pokusů
o ovlivnění (naředění moče, přídavek oxidujících, redukujících a bělicích
látek, či výraznou úpravu pH moče).
Výhodná je také možnost poskytovaná některými výrobci a to naskenování naexponované destičky a uložení vytvořeného obrázku v elektronické formě, což umožňuje eventuální pozdější dokladování či jiné využití.
Výrobců testovacích destiček i imunochemických analyzátorů využitelných
pro semikvantitativní stanovení benzodiazepinů v moči je celá řada.
Protože ale každý výrobce využívá ve svém výrobku jiný systém protilátka-
antigen (např. ULTIMED Drogy - rychlý screening v moči (ULTIMED ) je navázaný na
Oxazepam, zatímco Abbott AxSYM Abbott AxSYM na Nordiazepam) nejsou
výsledky zcela srovnatelné, resp. je vždy jiné pořadí citlivosti stanovení pro
různé typy benzodiazepinů. Například ULTIMED ukáže pozitivní reakci
u Midazolamu až při koncentraci 12500 µg/l, zatímco AxSYM má u Midazolamu limit
pouhých 200 µg/l. Může se proto stát, že u stejného vzorku ukáže jeden systém
negativní reakci, zatímco druhý poskytne pozitivní nález. K hodnocení
výsledku se proto musí přistupovat opatrně, zvláště v hraniční oblasti
koncentrací kolem hladiny pozitivity a pokud je to možné, využít raději více
systémů najednou a to nejen imunochemických, ale např. založených na principu
GC/MS apod.
Ekonomické náklady
Ekonomické náklady závisí
samozřejmě na zvoleném typu a výrobci testovacích destiček. Rozdílné jsou náklady
např. tehdy, když se použije sólo destička prokazující pouze benzodiazepiny
(volí se většinou
při cíleném prokazování benzodiazepinů), nebo zda se aplikuje skupinová
destička s 5 nebo 10 testy současně (volí se při screeningu drog, tj. když
se prověřuje i eventuální přítomnost jiných drog).
Cena jedné destičky se obvykle pohybuje v rozmezí cca 50 – 400 Kč.
Příklady možných zdravotních výkonů VZP:
Název zdravotního výkonu |
Číslo výkonu |
Počet bodů |
Psychotropní látky imunochemicky jednotlivě |
99151 |
428 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt –STAT |
92135 |
492 |
Drogy a léčiva – cílený imunochemický záchyt. |
92133 |
406 |
Použití pro klinické účely
Průkaz relevantní koncentrace benzodiazepinů a jejich
metabolitů v moči je indikován buď při kontrole zneužívání léků
s obsahem benzodiazepinů nebo pro kontrolu eventuálních záměrných či
náhodných hrubých chyb v aplikaci léků, např. při léčbě bolesti.
Literatura
- Woods, J.H., Winger, G.: Current benzodiazepine issues. Psychopharmacology, 1995, 118, 107 – 115.
- Barrett, A.M., Walshe, K., Kavanagh, P.V. et al.: A comparison of five commercial immunoassays for the detection of flunitrazepam and other benzodiazepines in urine. Addict. Biol., 1999, 4, 81 – 87.
- Fitzgerald, R.L.: Analytical toxicology of the benzodiazepines. Therapeutic Drug Monitoring and Toxicology. 1995, 16, 169-186.
- Drummer, O.H.: Methods for the measurements of benzoidazepines in biological samples. J. Chromatogr. B., 1998, 713, 201-225.
Poznámky
Appendixy
Autorské poznámky